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换笼时机(jī)的选择
在(zài)本号前(qián)文《换笼的频次》中提出(chū)了在(zài)确保动物健康,尤其是免受高浓度氨气伤害的前(qián)提(tí)下,尽量减少换(huàn)笼的频次可降低换(huàn)笼导致的小(xiǎo)鼠应激,进而提升其(qí)福利。然(rán)而(ér),在小(xiǎo)鼠设施管理实践中,如何实时地监控每一个(gè)笼盒内氨气的浓(nóng)度却是一个极大(dà)的挑战。考虑到监控器材和人力成本的消耗,在(zài)动辄上数万笼盒的设施中,基本无法达成每个笼盒都实(shí)施实时监控的要求。因此,多数设施管(guǎn)理者都会采用(yòng)固定间隔时间的换笼方案,如每周一次,或者每两周一次(cì),而不会对更换时笼盒内的氨气浓度进行测量。
这一管理方案的好处是简单且容易执行。然而,这(zhè)种简单划一的换笼设置既无法避免到个别笼盒会因偶然(rán)因素(如笼盒内发水)导致的氨气浓度快速上升而超过限值(25ppm)给小鼠带来的伤害,更存在(zài)未(wèi)达到氨气限值就换笼所导致的小鼠焦虑和应激水平的不必要上升。由此可见,建立一种简单方便且快速准确判定氨气浓度的方(fāng)法(fǎ)对决定何时换笼至关重要。那么在小鼠管理实践中有没(méi)有比较简单的氨气浓度判定方法呢?
小鼠是一种清洁意识明显的实验动物,其笼盒内通常(cháng)都(dōu)有固定(dìng)的屎尿排泄区(qū)域。统计分析结果显示(shì),大约80%的小鼠(shǔ)会在笼盒(hé)内远离筑巢区域的位置撒尿,且尿液的长期积累后会形成尿斑。研究表明,小鼠笼盒内的尿斑的大小和颜色(浅棕色、中等棕色或深棕色)及边缘状(zhuàng)态(模糊或清晰)与笼盒内氨气浓度有着极强的线性相关性。因此,尿斑的形(xíng)态可(kě)以作为一个虽然(rán)间接却直观(guān)的笼盒(hé)内氨气浓度估算对象。来自西雅图儿童研究所的艾达·M·华盛顿(Ida M Washington)和俄克拉(lā)荷马州立大学马克·E·佩顿(Mark E Payton)通过实时监控(kòng)笼盒内氨气浓度和观察对应的尿(niào)斑形态,将二者关联起来(lái),并建(jiàn)立了一种通(tōng)过尿斑大小、颜色和边(biān)缘状态来(lái)判定氨气(qì)浓度评分方法。他们(men)发(fā)现,随着笼盒内氨气浓度的(de)增加,尿斑的斑块面积逐渐变(biàn)大(dà),颜色会从浅棕(zōng)色向深棕色发展,而其边界也会从模糊到清晰。当氨气浓度小于1 ppm时,尿斑的(de)直径通常在1到2英寸之间,并呈浅棕色,且边界模糊,具有(yǒu)这样形态的尿斑的评分被设(shè)定(dìng)为1;当氨气浓度在1到25 ppm时,尿斑直径通常在2到3英寸、呈现中棕色、并且(qiě)边界模糊,具有(yǒu)这样形态的尿斑(bān)的评分被设定为2;当(dāng)氨气浓度在25到50 ppm时,尿斑(bān)的直径在3到4英寸之间、呈现深棕色、且边缘清晰,具有这(zhè)样形态的尿斑的(de)评分被设定为3,也将作为换笼(lóng)的标准;当氨气浓度(dù)超过50 ppm时,尿斑的直径通常超过了5英(yīng)寸、呈现深棕色、且边缘清晰,具有这样形(xíng)态的(de)尿斑(bān)的评分被设定为4(表示(shì)笼盒内环境(jìng)恶化)。
而这种依(yī)据(jù)尿斑特征的评(píng)分方法很容易掌握。因此(cǐ),小鼠饲(sì)养员(yuán)可通过从笼底观察(chá)尿斑特征轻(qīng)松地预测氨(ān)气浓度(dù)的数值水平(píng),从而确定换笼的时间(jiān)。该评分系统不仅通过尿斑形(xíng)态做到了间接地评估笼盒内的氨气浓度,为(wéi)依据氨气限定值(zhí)而确立换笼时机建立了一(yī)种简便易(yì)行的方法,进而提升了换笼时机选择的精准性,从(cóng)而降低了小鼠的应激水平,也极大地节约(yuē)了人力、物力和(hé)运行(háng)成本。在华(huá)盛顿和佩顿的尿斑评分系统建立之前,他们设施的动物护(hù)理人员对饲养3到5只小(xiǎo)鼠(shǔ)的笼盒实行每周换笼一次,而(ér)对饲养1到2只(zhī)小鼠的笼盒则每两周换笼一次。在(zài)此方案下,设(shè)施内约(yuē)50%的小鼠笼盒每周要更换一次(cì)。而在实施了尿斑评分系统后,每(měi)周仅需更换设施内约33%的笼盒。这意味着垫(diàn)料成本、笼具清洗量、灭菌时间和人工都会相应地减少。而通过动物护理人员观察,并没有发现小鼠的健康和福祉在新的管理实践中受到任何不利影响。