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齧(niè)齒類動物血常(cháng)規結果分析注意事項
血液(yè)學檢查(chá)是動(dòng)物(wù)疾病狀態評估、術前檢查和常規體檢中必不可少的內容。評(píng)估血常規檢測報告的可靠性並解讀其結果是(shì)獸醫朋友們的工作日(rì)常。本文就血液學檢查的一些要點(diǎn)進行分析探(tàn)討。
采血是進行血常規檢查(chá)的第一步,本公(gōng)眾(zhòng)號曾經發表《獸醫隨筆:實驗動物采血指南》一文,介紹采血(xuè)量和采血(xuè)點的一般指導意(yì)見。
進行血液學分析時通常建議用EDTA抗凝管采集樣本,但(dàn)采集時應該注意抗凝劑和血液的比例。樣本質量會顯著影響(xiǎng)檢測(cè)結(jié)果,常見的樣本質量問題有:
抗凝效果不佳導(dǎo)致出(chū)現血凝塊,會使血小板(PLT),白細胞(WBC),紅細胞(RBC),紅細(xì)胞壓積(jī)(HCT)假性降低(dī);
溶血會使RBC、HCT假(jiǎ)性降低的同時平均紅(hóng)細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅細胞血紅蛋白(MCH)假性升高;
乳糜血會(huì)使血紅蛋白(Hb)、MCHC、MCH假性升高;
樣本不新鮮會使紅細胞形態發(fā)生改變(biàn)導(dǎo)致MCV和HCT假性升高,MCHC假性降低,同(tóng)時白細胞形態也(yě)會發生改變。
紅細胞、白(bái)細胞和血(xuè)小板是血常規報告中(zhōng)需要(yào)解讀的三個方(fāng)麵。
紅細胞
相(xiàng)比於人及其(qí)他哺乳(rǔ)類動物,齧齒類動物的紅細胞自(zì)有其(qí)特征。倉鼠的RBC約(yuē)6.0微米,豚鼠的(de)約7.8微米。大鼠(shǔ)出生時紅(hóng)細胞較大(10.03 μm),但在出生後30天內變(biàn)到(dào)小於6μm。小鼠RBC大小約4-7μm,隨年齡增長而增加。多色性是齧齒類動物血象的一個常見特征(zhēng)。在豚(tún)鼠血塗片上還可(kě)見紅細胞疊連。特定疾病模型小鼠中,如(rú)β地中海貧血模型小鼠RBC可觀察到異常形態,例(lì)如靶形紅細胞、棘形狀紅細胞、淚滴狀紅細胞、破碎狀紅細胞、有核紅細胞等。

(圖片來源:https://www.researchgate.net/publication/233535082)
和大多數哺乳動物(包括人(rén))不同的是,新生(shēng)齧(niè)齒類動(dòng)物(wù)(小鼠、大鼠、豚鼠、沙鼠)的血(xuè)紅蛋白和血細胞比容值低於成年動物;新出生大鼠有16%的網織紅細胞,成年(nián)後則減少至2.5%;據(jù)報道,大鼠、沙鼠的(de)RBC計數存(cún)在性別差異,雌性的計(jì)數通常比雄性高(gāo)。不同品係的小鼠和大鼠,血紅蛋白(bái)值也會有很大的差異。
樣本采集部位或麻醉(zuì)的影響會導致血常規數據的變化。例如,從大鼠尾部(bù)采集的樣本中的血紅蛋白和紅細胞比容比從腹主動脈或心髒中采集的樣本中要高。豚鼠中已經證實RBC值可能由於麻醉期間發生脾內(nèi)紅細胞扣留(liú)而降低。
影響RBC參數的(de)非致病性條件還包括妊娠(shēn)、季節變化等。在大鼠中,紅細胞(bāo)比容在(zài)妊娠期間(jiān)減少。在倉(cāng)鼠中,RBC計數、血紅(hóng)蛋白濃度和紅細胞比容(róng)在冬眠期間升高,這(zhè)是因為在冬眠期間,倉鼠基礎代謝率降低,RBC壽(shòu)命(mìng)延(yán)長了。
紅細胞和貧血
紅細胞指標重點(diǎn)關注RBC、HCT和Hb,它們的變化可以提示動物貧血或紅細胞增多。
齧(niè)齒類動物中並沒有(yǒu)原發(fā)性的紅細胞增多症,但(dàn)可能(néng)見於輕度脫水的動物。貧血(xuè)則較為常見。初步判斷為貧血後,還需要關注平均紅細胞體積(MCV),MCH和MCHC,可用於輔助判斷貧血類型,這三項都偏低常見於缺(quē)鐵性貧血,而高於正常範圍多見於葉酸或維生素B12缺乏引起的貧血。網織紅細(xì)胞是尚未完全成熟的紅(hóng)細胞,是反映骨髓造血功能的重要指標。當其升高時,提示骨髓造血功能旺盛(shèng),可能有(yǒu)溶血性貧血、缺(quē)鐵性貧血等;而當其降低(dī)時,可能有再生障礙性(xìng)貧血、急性白血病等。
儀器分析的血常規化驗單隻能給出各種細胞的數量,但並不能給出細胞形態的異常描述。因此為了更準確分析(xī)血液學檢查結果還建議對血樣塗片進行形態學檢查。
RBC形態學可區(qū)分貧血的原因:出血、溶血、缺(quē)鐵、非再生性貧血、骨(gǔ)髓疾病或淋巴細胞增生性疾病(bìng)(白血病)等。
如果診斷為溶血(xuè)性貧血,則需要在血塗片中尋找血液寄生蟲的證據,如球狀(zhuàng)附紅細(xì)胞體(tǐ)和鼠(shǔ)血巴爾通體可能導致小鼠或大鼠貧血。如(rú)果出現小紅細胞增(zēng)多症、血(xuè)色素減少(shǎo)、總蛋白低、血小(xiǎo)板增多和網織紅細胞計數升高(gāo)則提示有慢性失血,建(jiàn)議檢(jiǎn)查體表寄生(shēng)蟲,在虱子嚴重感染的豚鼠和(hé)大(dà)鼠中可見這(zhè)種現象。
白細胞
白細胞是機體抵禦感染、調控炎症、免疫和造血的關鍵。
齧齒類動物的白細胞形態和其他哺(bǔ)乳動物相(xiàng)似,但又有一定區別,齧齒類動物的粒細胞被稱為嗜異性或假嗜酸性粒細胞,因為它(tā)含有紅色顆粒(lì),與(yǔ)嗜酸性粒細胞相似。豚鼠有(yǒu)獨特的Foa-Kurloff細胞(bāo)(一種T淋巴細胞),含有一個大的細胞(bāo)質包涵體。齧齒類動物的白(bái)細(xì)胞類型與(yǔ)其他哺乳動物相似,但淋巴細胞數量遠超過粒細胞:淋巴細胞約占86%,中性粒細胞約占10% ~ 25%,單核細胞約占6%,嗜(shì)酸性粒細胞約占1% ~ 4%,嗜堿性粒(lì)細胞(bāo)很少。
WBC計數每天都會(huì)發生波動,因此采集樣本的位置和時間不同,結果(guǒ)也可能不同。中(zhōng)性粒細胞計數隨著大鼠年齡的(de)增長而(ér)增加,淋巴細胞計數隨著年齡的增長而減少。

豚鼠的Kurloff 細胞
(圖(tú)片來源:https://en.wikipedia.org/wiki/Kurloff_cell)
白細胞:淋巴(bā)細胞
淋巴(bā)細胞增多
淋巴細胞分為T淋巴細胞和B淋巴細胞,大多在外周淋(lín)巴組(zǔ)織中生成並在血液(yè)和淋巴組織中循環。淋(lín)巴細胞的增多大多為(wéi)生理性的。反應性淋巴細胞增多的原因包括注(zhù)射疫苗後的短暫反應、長期免疫(yì)刺激、甲狀腺功能亢進等;腎上腺皮質功能減退也會(huì)導致淋(lín)巴細胞增多,並常伴隨低血糖、電解質異常,出現高鉀低鈉和高鈣血(xuè)症;淋巴瘤、胸腺瘤可見淋巴細(xì)胞異(yì)常升高,淋巴細胞性白血病則(zé)在淋巴細胞異(yì)常升高的同時(shí)伴(bàn)有其他細胞係的減少。
淋巴細胞減少
淋巴細(xì)胞減少最常見的原因是內外源性皮質類(lèi)固(gù)醇激素增多,導致其從血(xuè)液循(xún)環中轉移到淋巴組織中。在急性炎症反應、病毒感染以及發生內(nèi)毒素血症和敗(bài)血症時,也(yě)可見淋巴細胞減少。免疫缺陷病毒(dú)感染、免疫抑製藥物的使用也會讓淋巴細胞生成減少。淋巴回流受阻或丟失也會讓(ràng)其計數減少。

(A)淋巴細胞,特征是有深紫色圓(yuán)形核;(B)單核細胞,特征是有腎形細胞核;(C)中性(xìng)粒細胞,特(tè)征為有紫色多小葉細胞核。
(圖片來源:Bjorner & Zhu, 2019)
白(bái)細胞:中性粒細胞(bāo)
中(zhōng)性粒細胞增多
與其他哺乳(rǔ)動物一樣,急性炎症反應的特征是中性粒細(xì)胞增多並有核左移。但並不是出現中性粒細胞(bāo)增多(duō)就意味著急性炎症反(fǎn)應,動物經曆劇烈運動、驚嚇傷心等強烈情緒後也可出(chū)現生理性中性粒細胞增多,但不會出現核左移。
應激或皮質類固(gù)醇也(yě)可導致動物出現中性粒細胞數量增加,無左移。
此外慢性粒細胞性白血(xuè)病、中性粒(lì)細胞功(gōng)能(néng)障礙也可使中性粒細胞數量增(zēng)加,同時出現核左移、多組織髓外生成粒細胞、血小板減(jiǎn)少等異常。

正常(cháng)情況下,外周血液中性粒細胞以分葉核為主,胞核常分為2~5葉,杆狀核較少。中性杆狀核粒細(xì)胞增多或(和)出現晚幼粒細胞、中幼粒細(xì)胞,甚至原始/早幼粒細胞的現象,稱為核左移。
中性粒細胞減(jiǎn)少(shǎo)
中性粒細胞減少也非常常見,其中臨床常見的因素為嚴重的細菌感染,例如肺炎、敗血症(zhèng)、腹膜炎等,常會伴隨核左移和中毒性變化。骨髓疾病、藥物(wù)毒性、病毒(dú)感染和腫瘤等也可造成中性粒細胞(bāo)減少,同時可能(néng)會伴有紅細(xì)胞和血小板的減少(shǎo)。
白細(xì)胞:嗜酸性粒細胞
嗜酸性粒細胞(bāo)主(zhǔ)要聚集在皮膚、消化道和呼吸道黏膜等疏鬆結締組織中,它的增多常(cháng)見於寄生蟲感染的動物和發(fā)生I型超敏反應的動物。也由於其分布特點,大多血(xuè)液寄(jì)生蟲不會引起嗜(shì)酸性粒細胞(bāo)增多。此外,還有一些臨床(chuáng)原因可導(dǎo)致嗜酸(suān)性粒細胞增多,比如嗜酸性粒細胞性腸炎、嗜酸(suān)性肌(jī)炎等炎症反應;某些能促進嗜酸性粒細胞生成和釋放的腫(zhǒng)瘤(淋巴瘤、鱗狀細胞癌等);腎上腺皮質機能減退等。
白細胞:嗜堿性粒細胞
嗜堿性粒細胞參與遲發性過敏(mǐn)和寄生蟲免疫反(fǎn)應,因此嗜堿性粒細胞增多症常和嗜酸性粒細胞增多症同時發生。此外還可見於高脂血症、嗜堿性粒(lì)細胞性白血病和骨髓增生性疾病。
白細(xì)胞:單核細胞
單核細胞等主要功(gōng)能是吞噬作用、調節炎症反應、參與抗原(yuán)提呈、參與鐵的調節。因此當機體出現急性或慢性炎症、組織壞死時,都會導致單核細胞增多。中性粒細胞減少時也會出現單核細胞代償性增加。其他不常見的原因還(hái)包括應激或類固醇、單(dān)核(hé)細胞白血病等。齧(niè)齒(chǐ)類動物中,多達25%的F344大鼠會發生單(dān)核細胞性白血病。發病(bìng)動物(wù)外周血中,可見非典型性單核細胞,白(bái)細胞計數極度增高和溶(róng)血性貧血。
血小板
血小板(bǎn)為骨髓巨核細胞胞(bāo)漿裂解脫(tuō)落的小塊胞質,其主要作用是凝血和止血,修補破損(sǔn)血管。齧(niè)齒類(lèi)動物的血小板數量和(hé)凝血過程與其他哺乳動物相似。在小鼠、大鼠或豚鼠(shǔ)中,未觀察到血小板計數的性別或品係差異。大(dà)鼠(shǔ)的血小板會聚集,計數往往不可靠。
血小板減少
血小板減少症發生時,動物可出現瘀斑、瘀點、黏膜(mó)出血、止血困難等。但血液分析儀判讀為血小板減少時(shí),應做血塗片確認是否發生凝集,因為血小板做血液采集、運輸、儲存過程中會活(huó)化並凝集(jí)進而影(yǐng)響機(jī)器讀取數據。通過無創性靜脈穿刺采血、使用(yòng)檸檬酸鹽抗凝劑、減少采樣後儲存時間、避免低溫等措施可以減少這種影響。
通常血小(xiǎo)板減少是一過性的,跟多種(zhǒng)係統(tǒng)性疾病都有關聯,隨著疾病的康複,血小板(bǎn)計數也會恢複正常。持續性的或進行性(xìng)的(de)血小板減少症表明血小板生成或消耗持續(xù)失衡(héng)。例如血小板減少伴隨白細胞減(jiǎn)少和(或)貧血(xuè)通常提示(shì)骨髓疾病引起的造血功能障礙(ài);免疫介導的破壞等。
血小板增多
血小板計數增多可能由原發性血小板增多症、骨髓增殖性(xìng)疾病和繼發性血小板(bǎn)增多症引起。