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新聞資(zī)訊
 來源:實驗動物那些事兒 日期(qī):2024.05.14 

小鼠麻(má)醉指(zhǐ)導原則

目的

本文是由ARC獸醫人員設計的小鼠麻醉指導原(yuán)則,旨在提供一般建議。這並不意味著(zhe)它包含了適用於小鼠(shǔ)的所有可能(néng)藥物組(zǔ)合的詳盡列表。具體的麻醉方案應(yīng)根據特定(dìng)情況和研究需(xū)求與所在機構的獸(shòu)醫合作製定(dìng)。

麻醉是使動物(wù)完全或部分失去感覺,伴隨或不伴隨意識喪失。動物可能需要麻醉進行手術(shù)、可(kě)能引起疼痛的非手(shǒu)術操作,或需要固定的非疼痛(tòng)操作。在麻(má)醉前、麻醉過程中和(hé)麻醉後,必須采取(qǔ)措施確保動物的(de)安全(quán)和麻醉的有效性(xìng)。

麻醉可通過胃腸外給藥或吸(xī)入給藥的方(fāng)式進行(háng)。藥物的選擇取決於具體操作、研究(jiū)目的和其他因素,如動物的年齡。對於(yú)新生(shēng)小(xiǎo)鼠,有些特別考慮下文進行了概述。如對藥(yào)物(wù)選擇有疑問,請谘詢所在機(jī)構的獸(shòu)醫。

01、麻醉的一(yī)般指導原(yuán)則和(hé)注意事項(xiàng)

適應期:建議所有動物在運輸後適應一周,以(yǐ)防止應激引起的反應。動物至少需要72小時才能恢複到基(jī)本生理狀態。

禁食:由於(yú)小鼠無法嘔吐,通常麻醉前無需禁食。然而,如需禁食(例如為了保持體重),因小鼠(shǔ)的(de)高代謝率,禁食時(shí)間不應超過2-3小時。請注意,切勿限製飲水。

眼(yǎn)睛保護:在麻醉狀態下,小鼠(shǔ)的眼睛會持續睜開(kāi),可能導致角膜幹燥和損傷。因(yīn)此,在如下條件下,應塗抹眼膏(如(rú)Puralube® 或 Lacrilube®)來保護眼睛。

麻(má)醉持續時間超過 5 min;

通過麵罩進行麻(má)醉。

監護:無論使(shǐ)用何種(zhǒng)麻醉(zuì)劑,均應監測麻醉狀態下的小鼠,以確保心髒和呼吸功能不被過(guò)度抑製,以及麻醉深度適當(dāng)。

在沒有專用設備的情況下(xià),可以監測以下麻醉小鼠的參數:

麻醉深度:通過掐指檢查;

呼吸頻率和(hé)模式:正常未受幹擾的呼吸率約為 180 bpm,麻醉期(qī)間可接受 50% 的緩慢下降速率;

粘(zhān)膜顏色(sè):應為粉紅色而非藍色或灰色;

體溫:可使用(yòng)直腸溫度計監測(cè)體(tǐ)溫,體溫(wēn)應保持在 36℃ 以上;

血氧(yǎng)飽和度和心率:可用專用的齧齒類動物脈搏式血氧(yǎng)儀監測血氧飽和度 (> 95%) 和心率(300-800 bpm);

如對監(jiān)護或監護設備有任何問題,請與所在機構的獸醫聯係。

保溫:所有種屬在麻醉狀態下均存在(zài)低(dī)體溫的風險。小鼠由(yóu)於體表麵積與體重(chóng)比高,尤其(qí)容易(yì)受(shòu)到影響。低體溫對動物會產生顯著(zhe)的生理應激(jī),可能延長(zhǎng)恢複時(shí)間並(bìng)有潛在致(zhì)命風險(xiǎn)。

在所有麻醉(zuì)過程中(zhōng)提供額外的保溫措施。

補充熱源包括循環水毯、電熱墊和可在(zài)微波或水浴中加熱的市售產品(如等溫墊或凝(níng)膠加熱器)。

切勿直接將動物放在熱源上(shàng)。

如對使用或購買額外的(de)保溫來源有疑問,請(qǐng)與(yǔ)您所在(zài)機構的獸醫聯係。

補液:在麻醉時間較長或動物患病、老年或虛(xū)弱的情況下,考慮腹腔或皮(pí)下注射溫熱的液體。更多信息請(qǐng)谘詢您的獸醫。

恢複:持續監測動物直至其完全(quán)恢複。

在幹淨的籠子裏,將動物放在紙(zhǐ)巾上(不使用墊料)。這樣可(kě)以最大程度地減少氣管阻(zǔ)塞或(huò)肺炎的風險。

麻醉後的動物(wù)單獨放在一個籠子裏進行恢複。

恢複期間(jiān)繼續提供額外的保溫(wēn)。

當動物能夠走動時,將其送回原籠中子,並提供飼料和水。

根據所進行的手術,為了避免同籠夥伴啃縫線或切口處的創傷,小鼠可能需要在術後階段(duàn)單獨飼養。任何單獨飼養的計劃都應(yīng)包括在IACUC方案中,以便進行審查和批準。

02、麻醉藥物和程序

吸入麻醉劑: 異氟烷是首選的吸入麻醉(zuì)劑。 起(qǐ)效快、恢複(fù)可靠。

A. 吸入麻醉可以通(tōng)過滴瓶法、誘(yòu)導室(shì)、麵罩或氣管插管使用精密蒸汽器進行。

i.滴瓶法:

a.請勿使小鼠直接接觸(chù)液體吸入麻醉劑(可通(tōng)過在棉花或紗布上放置不可滲透的網格來實現)。

b. 由於無法控製室內的麻醉劑濃度,並且濃度可能迅速(sù)達到(dào)有毒水平,因此該方法僅適用於非常短的手術,如尾部活檢、皮下腫瘤(liú)植入或麵罩(zhào)麻醉前的誘導。

ii.誘導(dǎo)室、麵罩和氣管插管:

a.這些需要配備氧氣源(yuán)和(hé)精密蒸發器的氣體麻醉機。一些研(yán)究單位可能使用室內空氣而不是(shì)純氧作為氣源,這也是(shì)可(kě)接受(shòu)的。

b.蒸(zhēng)發器必須與特定的吸入麻醉劑兼容。

c.由(yóu)於小鼠呼吸(xī)能力較小,使用非循環呼吸係統。

iii. 當使用吸入性麻(má)醉時,使用通風櫃或配備氣體(tǐ)清除係統的麻醉係統,以盡量減少職(zhí)業暴露於排出氣體(tǐ)。

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B. 注射麻醉劑:氯胺酮/賽(sài)拉嗪聯(lián)合使用是小鼠的首選注射麻醉劑。

下麵列出了其他常用的注射劑。

i. 小鼠對各種麻醉藥的敏感性差異顯著。 年齡、體質(zhì)、品係、健康狀況、基因調控和性別等因素都可能影(yǐng)響麻醉敏感性。以下劑量僅為一般指導原則,基於上述因素可能存在(zài)顯著差異。在您的方案中添加麻(má)醉劑時,建議提供一個範(fàn)圍,以允許根據每隻動物的特定需求進行給藥。

ii. 不建議在小鼠中進行肌肉注射(IM),因為可能導致組織刺激、跛(bǒ)行和自殘等並發症。

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*一個很(hěn)好的初始方案是 100 mg/kg 氯胺酮和 7 mg/kg 塞拉(lā)嗪。

**阿替美唑(5 mg/mL)是右美托(tuō)咪(mī)定(0.5 mg/mL)濃度的 10 倍。

您需要 4-6 倍(bèi)於右(yòu)美托咪定體(tǐ)積的阿替(tì)美唑(5 mg/mL)來逆轉右美托咪定。然而,阿(ā)替美唑的安全範圍非常高,因此(cǐ)如(rú)果逆轉(zhuǎn)非常緊急,給予右美托咪定等體積的阿替美唑,可使(shǐ)阿替(tì)美唑的劑量增加 10 倍,這是安全的。

同樣,使用與塞拉嗪(20 mg/mL)等(děng)體積的阿替美唑 (5 mg/mL) 逆轉也有效。雖然塞拉嗪具有更高的濃度(20 mg/mL),但阿替美唑(5 mg/mL)更純淨,且與α2 受體結合更緊密,因(yīn)此等(děng)體積逆轉塞拉嗪(qín)也可行。

C. 注射麻醉劑的一種類型是局部麻醉劑。

i. 局麻藥通過特異性結合神經細胞(bāo)膜上的電壓門控 Na + 通道來(lái)阻斷神經衝動。

ii. 給藥途徑包(bāo)括粘膜(鼻、眼等)局部(bù)給藥或直接(jiē)注射到組織和神經束周(zhōu)圍。

iii. 在疼痛刺激(如切口(kǒu))之前給予局部麻醉劑被認為是輔助鎮痛藥物,與阿片類(lèi)和 非甾體(tǐ)抗炎藥(NSAID)一起使用(yòng)。

iv. 由於(yú)持續時(shí)間較短(數小時),不鼓勵將(jiāng)局部麻醉劑作為主要鎮痛藥物使用,

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03、對小鼠(shǔ)麻醉(zuì)的特殊考慮:仔鼠(shǔ)麻醉

目前文獻中描述(shù)了幾(jǐ)種適用於新生齧齒動物的麻醉方法,包括注射麻醉、吸入麻醉和低(dī)溫麻醉(zuì)。 

新生齧齒動物的麻醉會導(dǎo)致親代(dài)啃(kěn)食後代的問題。可通過確保新生仔鼠(shǔ)完全恢複後再歸還給母鼠來減(jiǎn)少這種情況。其他措施包括(kuò)讓(ràng)幼仔接觸來自於母鼠籠中的汙染墊料,並將幼仔放在窩仔(zǎi)中間位置。

低溫(wēn)麻(má)醉

低溫麻醉隻適用於7日齡以下的新生齧齒動物,並且不應用於持續時間超過30分(fèn)鍾的手術。

動物不應直接置於(yú)冰上(在動物和底層冰浴之間使用乳膠手套或其他物(wù)質)。

當足部(bù)反射消失時,動物已(yǐ)達到適當的麻醉水平。

手術過程中請勿使用白熾燈,因為它會使手術區域變(biàn)熱,導致動(dòng)物從手術麻(má)醉狀態(tài)中蘇醒。

麻醉後,動物應緩(huǎn)慢複溫。快速升溫可能會導致組織損傷。可使用循環水毯、加熱墊 (40℃) 或培養(yǎng)箱 (33℃) 中給動物重新升溫。

幼仔能夠在無直(zhí)接物理刺激的(de)情況(kuàng)下移動後,可將其歸還給母鼠。

吸(xī)入麻醉

新生齧齒動物可能比成年齧齒動物需要更長的吸入麻醉誘導時間。

在麻醉盒(hé)中進行誘(yòu)導通常需 5% 異氟烷,維持(麻醉誘導盒或鼻錐)需 1-2%(流速 = 0.3-0.6 L/min)。

注射麻醉

氯胺酮/塞(sāi)拉嗪(qín)是 7 日齡以上(shàng)小鼠的推薦注(zhù)射麻(má)醉劑:通(tōng)過 27g 針頭 IP 注射 50-150 mg/kg 氯胺酮和 5-10 mg/kg 塞拉嗪(最(zuì)大體積(jī) = 0.5 mL)。

對於7日齡以上的小鼠,推薦使用氯胺酮/塞拉嗪作為注射麻醉劑:使(shǐ)用27g針頭腹腔注射50-150 mg/kg氯(lǜ)胺(àn)酮(tóng)和5-10 mg/kg塞拉(lā)嗪(qín)(最大(dà)體積=0.5 ml)。

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