血生化檢測

我們在前文（wén）《齧齒動物（wù）血生化項目分析（上）》中介紹了齧齒動物的蛋白質（zhì）與肝膽功能指標以及（jí）腎髒功能指標的檢測意義。本文我（wǒ）們將繼續對齧齒動物的（de）脂質代謝、胰腺功能、糖代謝等相關常見（jiàn）血生化指標進（jìn）行介紹。

脂代謝檢測

脂質的運輸對機體內細胞功（gōng）能、代謝等起著至關重要的作用，此外它（tā）還對組織起著保護作用（yòng），也作為生物體最重要的能量來源之一。由（yóu）於（yú）脂質具有很廣泛的作用，因此其穩態也會（huì）隨著機體疾病等發生變化。

1.總膽（dǎn）固醇（Total cholesterol, TC）

血清總膽固醇指血液中各脂蛋白所含膽固醇總和。齧齒類動物的脂代謝指標與人類（lèi）相比差異明顯。大小鼠體內的大部分膽固醇都以高密度脂蛋白形式存在，且缺乏膽固醇酯轉運蛋白（CETP）。膽固（gù）醇（chún）濃度的增加多見於動物內分泌、肝髒或腎髒疾（jí）病；降低（dī）則常見於動物營養不良等。

2.甘油三酯（Triglyceride, TG）

甘油三酯構成脂肪組織，參與TC合成（chéng）以及血栓形成。需要注意的是，小鼠的血脂比較穩定，對抗高血脂的能力很強，甘油三酯不（bú）容易升高，尤（yóu）其C57BL小鼠一（yī）般不（bú）適合單純用於高甘油三酯（zhǐ）血症的造模。TG升高多見於動物過度肥胖、糖尿病等，而營養不良則是導致其降低的主要因素。

3.高密度脂蛋白（High-density lipoprotein, HDL）

高（gāo）密度脂蛋白主要由肝髒和小腸合成，含有膽固醇、蛋白質和磷脂，但甘油三酯很少。 與人類和非人靈長類（lèi）動物不同的是，大鼠體（tǐ）內的HDL濃度高於LDL（低密度脂蛋白膽固醇），這可能（néng）是由於大鼠體內缺乏膽（dǎn）固醇酯轉運蛋白（CETP）所致。

高密度（dù）脂（zhī）蛋白可以清除體內膽固醇，當（dāng）HDL升高時，並非（fēi）病理表現，無需關注；當動（dòng）物出現動脈硬化、糖（táng）尿病、慢性腎衰時，HDL表現為降低，且老年動物更易出現降低情況。

4.低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein, LDL）

低密度（dù）脂蛋白由極（jí）低密度脂蛋白轉化而來，含（hán）有豐（fēng）富的蛋白質、少（shǎo）量的（de）膽固醇和甘油三酯（zhǐ）。因此，LDL出現降低的情況，提示動物機體血脂不高，可不予關注（zhù）；但當LDL出現升高時（shí），應該考慮甲狀腺功（gōng）能低下、慢性（xìng）腎（shèn）衰等，尤其（qí）需要關（guān）注動脈（mò）粥樣硬化，LDL是發生（shēng）動脈粥樣硬化的重要（yào）危險指標之一。

5.脂蛋白（Lipoprotein, Lip）

齧齒類動物會在肝髒和小腸中合成載脂蛋白（apoB-100和apoB-48），它們是血漿中運輸脂（zhī）類的重（chóng）要成分。血漿中載脂蛋白水平（píng）上升，與糖尿病腎（shèn）病、尿毒症（zhèng）等相關；肝髒疾病可使載脂蛋白水（shuǐ）平下降。

6.遊離脂肪酸（Nonestesterified Fatty Acid, NEFA）

遊離脂肪酸在肝髒、脂（zhī）肪和乳腺組織中合成（chéng）。當動物長期使用高脂肪/低碳水化合物的飼料時，會導（dǎo）致NEFA合成減（jiǎn）少；當動物患有（yǒu）伴有（yǒu）脂肪酶活（huó）性增高的（de）高血脂症時，會導（dǎo）致血漿中NEFA增加。

胰腺（xiàn）功能檢測

胰腺分為兩部分功能，一部分具有外分泌功能，這部分又稱為胰腺腺泡，是胰腺最大的組（zǔ）成部分，用來評估胰腺胰泡功能（néng）的檢測包括澱粉酶和脂肪酶。另一部分具有內分泌（mì）功（gōng）能，許多檢測都可用來評估胰腺的內分泌功能，如傳統的血糖（táng）監測，以及果糖胺和糖化血紅蛋（dàn）白等。

1.澱粉酶（Amylase）

澱粉酶分子量較小，可被腎小球（qiú）濾過，是尿液中唯一可見的血清酶。澱（diàn）粉酶雖主要來（lái）源（yuán）於胰腺（xiàn），但唾液腺和小腸（cháng）也可以產生。澱粉酶在大（dà）鼠和小鼠的唾液腺中的濃（nóng）度高於（yú）其他實驗動物，因此大小鼠澱粉酶的增（zēng）高也可以考慮涎腺疾病。

通常，血澱粉酶濃度升高最常見於急性胰腺炎（yán），此外，慢性胰腺炎的複發期（qī）和胰管阻塞也可致（zhì）澱粉酶升高。但是澱粉酶升高（gāo）的水平與胰腺炎的（de）嚴（yán）重程度沒有直接的比例關係。由於澱粉酶可以經腎髒排泄，因此任何原因導致腎小（xiǎo）球（qiú）濾過率降低（dī）時，都可（kě）引起血清澱粉酶升高。

2.脂（zhī）肪酶（Lipase）

脂肪酶是一組催化長鏈脂肪酸甘油酯水解的酶。大多數（shù）血清脂（zhī）肪（fáng）酶來源於胰腺，少量來源於胃腸道（dào）黏膜。過量的脂肪酶經腎髒濾過，因此在胰腺疾（jí）病早期，脂（zhī）肪酶仍處於正常水平，當病情逐漸加重（chóng）時，脂肪酶水平才出現升高趨勢。

在慢性進行性胰腺疾病中，受損的（de）胰腺細胞會被結締組織取代，導致不能產生相應的酶，因此澱粉（fěn）酶和脂肪酶會呈現漸進性降低。脂肪（fáng）酶活（huó）性升高多見於腎髒和肝髒功能異常。此外（wài），服用類固醇藥（yào）物可（kě）引起脂肪酶升（shēng）高，但（dàn）對澱粉酶無影響。

糖代謝檢測

1.葡萄糖（Glucose, Glu）

血糖的水平可（kě）以用來評估胰腺功能，其調（diào）節機製比較（jiào）複雜，除了胰島素分（fèn）泌缺乏外，胰高血糖素、甲狀腺素、腎上腺素和糖皮質激素都可以使血糖（táng）升高；葡萄糖降低多見於營養不良、慢性貧血等。由於成熟紅細胞會利用葡萄糖提供能量，因此在使用血漿或者血清樣本時，應立即將血清或血漿與紅細胞分離，否（fǒu）則在室溫條件下，紅細胞（bāo）會使樣本中血糖含量每小時下降10%。在檢測葡萄糖前，應對動物（wù）進行禁食，但（dàn）對於（yú）齧齒（chǐ）動物（尤其小鼠）來（lái）說，由於它們（men）屬於夜間進食（shí）動物，如果（guǒ）進行夜（yè）間禁食（shí），其代謝（xiè）消耗相當於（yú）靈長類動物禁食24-48小時（肝髒糖原基（jī）本耗盡），因此5-6小時禁食更適合小鼠。

2.糖化血紅蛋白（Glycated hemoglobin, GHb）

糖化（huà）血紅蛋白也稱為血紅蛋白A1C（HbA1c），是血紅蛋白與葡萄（táo）糖發生不可逆結合反應的產物。當機體發生高血糖時，血紅（hóng）蛋白與葡萄糖結合增加，從而使糖化血紅蛋白升高，因此糖化血紅蛋白可以（yǐ）直接反映機體（tǐ）血糖水平。糖化血（xuè）紅蛋白反映的是紅細（xì）胞壽命期間的平均血糖（táng）濃度，大鼠紅細胞壽命約60天，小鼠紅細胞壽命（mìng）約（yuē）為（wéi）35-50天。因此和果糖胺相比，糖化血紅蛋白反映了更長時間內的血糖水平。但需要注意的是如果檢測是基於（yú）高效液相（xiàng）層析（xī）法原理，由於溶血（xuè）性貧血動物的紅細胞壽命短，因此會導（dǎo）致（zhì）糖（táng）化血紅蛋白結果出現（xiàn）假性降低。

3.果（guǒ）糖胺（Fructosamine）

果糖胺（àn）是葡萄糖與蛋白質（尤其白（bái）蛋白）發生（shēng）不可逆（nì）結合的產物。果糖胺升高表示動（dòng）物持（chí）續存在（zài）高（gāo）血糖；但動物發生低蛋白血症，其血清（qīng）果糖胺水平會（huì）假性降低。

有研究表（biǎo）明，果糖胺可（kě）在臨床（chuáng）研究（jiū）中，可作為糖尿病動物的血（xuè）糖監測的（de）有效指標。

其（qí）他

在臨（lín）床檢測中，還有一些生化項不針對任何器官或係統（tǒng），但可以輔助（zhù）提供一些診斷信（xìn）息，如乳酸脫氫酶、肌酸激酶等。

1.肌（jī）酸激酶（creatine kinase, CK）

許多組（zǔ）織中都含有肌酸激酶，胃腸道、腎髒、脾（pí）髒和胰腺中含有少（shǎo）量（liàng）CK，而骨骼（gé）肌、心肌和大腦中含有大量CK。因此當（dāng）骨骼肌、心肌受損時（shí），CK會從細胞中滲出，導（dǎo）致血液中CK含量增加。

由於任何損傷肌細胞膜（mó）的（de）物（wù）質都可以導致血液中CK升高，在實際（jì）檢測時，可對（duì）CK同工酶檢測來進行區分損傷（shāng）來源。CK有（yǒu）3中主要同工酶：CK-MB（心髒型）、CK-BB（腦型）、CK-MM（骨骼型）。比較特殊的是，在大（dà）鼠血小板中，CK含量是紅細胞（bāo）的（de）30倍，且目前僅發現存在CK-BB。

另外，肌內注射、手術等（děng）導致肌肉（ròu）損傷可引起CK升高；   EDTA、陽光直（zhí）射或測定不及時可引（yǐn）起樣本中CK假性（xìng）升高。

2.乳酸（suān）脫氫酶（lactate dehydrogenase, LDH）

乳酸脫氫酶是一種（zhǒng）催化乳酸轉化為丙酮酸的血清酶。LDH一般不具有器官特異性，它來源廣泛，幾乎所有的（de）組織中都含有LDH，但是物種間分布具有差異。如大鼠骨骼肌中分布最多，其次是心肌（77%）和肝髒（41%）。

LDH的（de）升高雖然多見於肝髒受損和肌肉損（sǔn）傷，但是它缺乏評價肝損傷的特異性和敏感性。因（yīn）此在齧齒動物中，LDH一般多用於檢測實驗性誘導心肌損傷。為了提高LDH測（cè）定心肌損傷的特異（yì）性，也可以測定其同工酶，即LDH1和LDH2。

需要注意的是，在常用的實驗動物中，血小板、紅細（xì）胞、白細（xì）胞、肝髒中都可能會表達LDH同工（gōng）酶，因此肝損傷、溶血和凝血均會混淆心髒（zāng）損傷的診斷。另（lìng）外，感染（rǎn）乳酸脫氫酶增高病毒（LDEV）的小鼠，血清中LDH含量可增（zēng）高3-5倍。

3.C-反應蛋白（C-reactive protein, CRP）

CRP是（shì）第一（yī）個在人類（lèi）身上發現的急性期反應蛋白（Acute Phase Reaction Proteins，APR），目前CRP也被認為是齧齒動物的APR蛋（dàn）白，肝細胞是合成CRP的主要部位。CRP的主要生物學功能是通過於配體（凋亡（wáng）或壞死的細胞，或入侵的細菌、真菌、寄生蟲等的磷（lín）酰膽堿（jiǎn））結合，激（jī）活補體（tǐ）和單核吞噬細胞係統，將帶有配體的病（bìng）原體或病理性細胞清除。在齧（niè）齒動物體（tǐ）內，當炎症或創（chuàng）傷發生後（hòu）6h內，CRP可迅速（sù）升高至上千倍，在疾病治（zhì）愈後，其含量急速下降。發（fā）生心髒病、敗血症和腫瘤等多種疾病（bìng），CRP都會急劇上升。

比較特殊的是，健康（kāng）大鼠體（tǐ）內CRP值較高，且CRP的水（shuǐ）平與年齡相關並呈正比。在健康小鼠（shǔ）和豚鼠血（xuè）清中，幾乎無法檢出CRP。在這兩種動物體內，CRP不作為急性期（qī）蛋（dàn）白而發揮（huī）作用。特別是豚鼠，在（zài）正常狀態和急（jí）性期豚鼠血清中，都無法（fǎ）檢出CRP，這主要是因為豚鼠CRP基因中缺乏適當的啟動子區域。